| 可能原因 | 解决方案 |
| 核酸投入量偏低 |
若共建库样本为共提取 total 核酸样本,需对样本中的 RNA和 DNA 分别进行 Qubit 定量,并根据样本类型按说明书中推荐扩增循环数进行文库扩增 |
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实验过程中须使用 RNase-free 耗材,操作环境确保无 RNase 污染,否则会影响 RNA 样本的反转效率 |
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| 共建库核酸样本中若含有过多的螯合剂、胍盐、苯酚、蛋白质、乙醇等杂质,会影响 RNA 反转录酶活性,建议参考步骤七:扩增文库纯化使用 2X NadPrep® SP Beads 纯化核酸样本,替换洗脱试剂为 Nuclease Free Water |