甲基化文库构建过程中未发生甲基化修饰的 C 碱基转化率低于 99% 的可能原因有哪些？该如何解决？

可能原因

解决方案

转化后文库被未转化文库污染 

使用带滤芯 Tips；转化结束后及时更换新的乳胶手套， 更换新的工作台面以及新的移液器。

Bisulfite Reagent 容易发生氧化，结晶析出，导致亚硫酸盐溶液浓度降低，影响转化效率

在有效期以内使用转化试剂盒；控制 Bisulfite Reagent 暴露在空气中的时间。

投入量过高 

使用酶转化方案时，严格控制样本投入量，推荐投入量 在 10-200 ng 之间。