NadPrep®️ 血浆游离 DNA 双端分子标签文库构建试剂盒对 cfDNA 样本有哪些具体要求？

提取试剂盒推荐

cfDNA

QIAamp Circulating Nucleic Acid Kit（Qiagen；货号：55114）

溶剂

推荐使用无核酸酶水、0.1 × TE（low TE）、10 mM Tris-HCl（pH 8.0~8.5）或提取试剂盒配备的Buffer溶解DNA样品。酶切片段化试剂多对EDTA浓度敏感，应避免使用含EDTA的溶剂溶解。如有必要可进行1.8-2.0 ×磁珠纯化去除。

定量

基于分光光度计原理的NanoDrop和基于双链DNA荧光染料的Qubit®、PicoGreen®进行定量。

纯度

OD₂₆₀/OD₂₈₀=1.8-2.0；OD₂₆₀/OD₂₃₀=2.0-2.5。OD₂₆₀/OD₂₈₀>1.9表明有 RNA 污染，<1.6表明有蛋白质、酚等污染；OD₂₆₀/OD₂₃₀<2.0，则表明有碳水化合物、盐类或者有机溶剂污染。

片段分布

cfDNA

Bioanalyzer或Bioptic（Qsep）分析主峰~160 bp，次峰~320 bp。