酶切片段较大或 DNA 完全没有片段化的可能原因有哪些？该如何解决？

可能原因

解决方案

DNA 溶液中 EDTA 浓度 > 1 mM 

推荐使用磁珠法或柱式法纯化核酸，并用试剂盒提供的 TE Solution 溶解。

DNA 纯度较差

样本纯度要求 OD₂₆₀ / OD₂₈₀ =1.8-2.0；OD₂₆₀ / OD₂₃₀ =2.0-2.5。 若样本中存在胍盐及杂蛋白污染时会影响酶切效率，推荐使用磁珠法或柱式法纯化核酸，并用试剂盒提供的 TE Solution 溶解。

反应体系混匀不充分

确保片段化 Master Mix 充分混匀后，再加入样品中，并再次充分混匀后进行反应。